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Food Chem. X|河北农业大学桑亚新教授:通过对修饰蛋白的磷酸化和结构表征提高缢蛏肌原纤维蛋白的凝胶特性

来源: 聚展网 2023-12-01 16:46:45 466 分类: 肉类加工资讯

缢蛏(Sinonovacula constricta)原产于中国和日本的河口和泥滩。作为一种经济上重要的海洋双壳类动物,缢蛏在中国从辽宁到福建的沿海地区被广泛养殖。2020年蛏子年产量为869 251 t。蛏子是一种著名的海鲜,其蛋白质含量高、多不饱和脂肪酸丰富,是中国一种传统食物。然而,在正常的冷藏条件下,由于酶和微生物作用,新鲜蛏子的保质期较短,限制了其养殖的进一步扩大,进一步制约了养殖户收入。将缢蛏加工成海鲜香肠或海鲜肉丸等增值产品,是缢蛏产业增值的途径之一。肌原纤维蛋白(myofibrar proteinMP)约占总蛋白质含量的55%65%,对凝胶特性有显著影响。凝胶特性是食品制造的重要功能属性,然而,蛏子蛋白较差的胶凝性能限制了蛏子在胶凝产品中的应用。因此,对蛏子MP进行改性,提高其凝胶性能,对于进一步开发高附加值的蛏子产品尤为重要。

蛋白质的修饰包括物理修饰、化学修饰和生物修饰。与糖基化或酰基化驱动的化学方法相比,磷酸化被认为是一种更安全的化学修饰方法,在此过程中不会产生有毒产物,这使得它对食品工业具有优势。蛋白质磷酸化是指形成C—OPCNP共价键。三聚磷酸钠(sodium tripolyphosphateSTPP)、三聚磷酸钠(sodium trimetaphosphateSTMP)、聚磷酸钠(sodium polyphosphateSTTP)和焦磷酸钠(sodium pyrophosphateTSPP)是常用的磷酸剂食品工业。这些试剂易于获取,并且有足够的反应基团与蛋白质相互作用;它们可以有效地进行蛋白质分子的磷酸化,改善其功能和胶凝特性。虽已有研究已经研究了磷酸盐处理可以使MP结构改变和功能改善,但目前关于磷酸磷处理对蛏子MP的影响的理解范围有限。因此,有必要探索在磷酸化处理过程中蛏子MP的结构变化和凝胶性质的影响。

河北农业大学食品科技学院Zhang Qing研究了4 种不同的磷酸盐(STPPSTMPSTTPTSPP)通过其构象变化、聚集行为、胶凝性能以及构象变化与性能改善之间的关系,以修饰蛏子的MP。本研究的目的是为提高蛏子MP的凝胶性能提供一种方法,从而扩大蛏子在凝胶基增值产品中的应用。

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与未处理的MP相比,处理后的MP的磷含量显著增加(P0.05)。MP-TSPP中磷含量最高(15.6 mg/g),其次是STTP9.6 mg/g)、STMP12.7 mg/g)和STPP14.0 mg/g)(P0.05)。

蛏子MP的主要蛋白为肌球蛋白重链(myosin heavy chainMHC)、M蛋白、肌动蛋白和原肌球蛋白,分子质量分别为220974437 kDa。磷酸盐处理后,MHCM蛋白、肌动蛋白和原肌球蛋白的条带强度变化不显著。

A. 磷含量;B. 不同磷酸盐处理后MPSDS-PAGE谱图;C. MP样品在4000~500 cm1范围内的傅里叶变换红外(Fourier transform infrared spectrometerFTIR光谱图;D. 圆二色光谱;E. 二级结构;F. MP样品的巯基含量。字母不同表示差异显著(P0.05)。下同。

1  磷酸化对MP结构的影响

TSPP处理后,在208 nm处明显增强螺旋结构。与未处理的MP相比,MP-STPPMP-STMPMP-STTPα-螺旋结构含量显著降低(P0.05),无规卷曲结构和β-折叠状结构含量显著升高(P0.05)。
在粒径方面,未处理的MP的粒径(1 348.6 nm)明显大于处理后的MPMP-TSPP粒径最小(255.83 nm)(P0.05)。与未处理的MP相比,所有处理过的MP的溶解度都有显著增加(P0.05)。

2  MP样品的(A)粒径分布、(B)平均粒径和(C)溶解度

扫描电子显微镜canning electron microscopeSEM结果显示,未经处理的MP呈现出分布和尺寸不均匀的片状结构;处理后的MP片状结构减小。

3  MP凝胶样品的微观结构(×300

低场核磁共振(low- field nuclear magnetic resonanceLF-NMR)结果显示,MP-TSPPT22MP相比,弛豫时间明显缩短。除MP-STPP外,处理后的MP凝胶的T23向更短的弛豫时间方向明显移动。

MP-TSPP中的最终储能模量(G)值达到最大值,增加了约倍,导致凝胶结构更强。磷酸盐显著提高了MP凝胶的疏水力、离子键和二硫键P0.05)。特别是,TSPP的疏水性和二硫键含量增加了倍。

样品的(A)保水能力(WHC)、(BNMR、(CG、(D)损耗模量G′′)、(E)分子力

MP的磷酸化含量(phosphorylation contentPC)与可溶性、胶性、耐嚼性、疏水性和二硫键呈显著正相关(P0.05)。

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A. MP结构与MP凝胶性能、流变性能的相关性分析;B. MPSTPPSTMPSTTPTSPP的机理。

5  MP结构与性能的相关性分析与 MP的提出磷酸化机理

综上,磷酸官能团被成功地引入到MP中,改变了MP的构象,提高了其聚集行为,从而获得了良好的凝胶性能。磷酸化显著提高了磷酸化含量,进一步增加了氢键的数量,使MP具有更好的溶解度,增强了蛋白质凝胶中网络结构的稳定性。同时,磷酸化增强了凝胶的硬度,通过降低游离水的含量和蛋白质凝胶的流变性能,形成了三维多孔结构。结果表明,TSPP处理后的MP凝胶性能最好,这是由于其相对较低的分子质量和较短的链长。TSPP磷酸化是一种理想的方法来修饰缢蛏MP,以获得更好的功能特性。

文章Improvement in the gelling properties of myofibrillar protein from the razor clam (Sinonovacula constricta) through phosphorylation and structural characterization of the modified protein发表于Food Chemistry: X 202320卷

河北农业大学食品科技学院桑亚新教授为本文通信作者
文章链接:https://doi.org/10.1016/j.fochx.2023.101006

翻译:李婉君、龚艺

责编:刘莉

专家介绍

桑亚新,河北农业大学副校长,食品科技学院教授、博士生导师,日本筑波大学访问学者。教育部食品科学与工程专业教指委委员,中国食品科技学会第二届青年委员,河北省食品学会秘书长,河北省海洋学会常务理事,国家食品安全管理体系(HACCP)审核专家,国家注册有机食品审核员。

已从事食品科研、教学和生产一线工作20余年,主要研究方向为:农副产品综合加工利用、益生菌与益生元和食品微生物等领域。获得省级科技进步一等奖3项,省级二等奖和三等奖各1项,国家教学成果二等奖和河北省教学成果一等奖各1项,市厅级奖励30余项;主持国家“十四五”重点研发计划乡村产业共性关键技术研发与集成应用专项特色干果产业关键技术研究与应用示范(项目编号2022YFD1600400),主研“十三五”重点研发计划食品安全关键技术研发”专项重要食品真实性多维鉴别检测关键技术研究子课题食品产地精准溯源技术研究”和“食品内源性身份特征甄别技术研究”;主持国家“十二五”公益性行业科研专项—贝类副产物加工利用共性关键技术研究(NO.2008050464)和扇贝对虾副产物综合利用关键技术研究与中试(NO.2012050310105),其他省部级科研项目20余项,主编食品微生物学等教材专著10余部,发表高水平论文70余篇,申请国家发明专利20余项,获得国家发明专利8 项,转化2 项。

专辑约稿


“肉品质量安全与检测技术”|专辑主编张岩研究员

“肉品品质变化及其机制机理研究”|专辑主编臧明伍教授高级工程师

“肉类微生物多样性与肉制品风味分析”|专辑主编徐宝才教授

“肉品及其副产物加工及高值化利用”|专辑主编王道营研究员


新刊启动  Food Science of Animal Products《动物源食品科学》(英文),欢迎投稿


Food Science of Animal Products(ISSN:  2958-4124, e-ISSN :  2958-3780)是一本国际同行评议、开放获取的期刊,由北京食品科学研究院、中国肉类食品综合研究中心主办,中国食品杂志社《食品科学》编辑团队运营,属于食品科学与技术学科,旨在报道动物源食品领域最新研究成果,涉及肉、水产、乳、蛋、动物内脏、食用昆虫等原料,研究内容包括食物原料品质、加工特性,营养成分、活性物质与人类健康的关系,产品风味及感官特性,加工或烹饪中有害物质的控制,产品保鲜、贮藏与包装,微生物及发酵,非法药物残留及食品安全检测,真实性鉴别,细胞培育肉,法规标准等。


投稿网址:

https://www.sciopen.com/journal/2958-4124


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